在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里,一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β
胡萝卜素,它呈现金黄色泽,故称“金色大米”。“金色大米”的培育流程如图所示,请回答下列问题。(已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—)。
(1)培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心是 ,通过该操作形成了图中的 (填字母),它的构成至少包括 等。
(2)在研究过程中获取了目的基因后采用 技术进行扩增。在构建c的过程中目的基因用(填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)进行了切割。检验重组载体导入能否成功,需要利用 作为标记基因。
(3)过程d通常采用 法,过程e运用了 技术,在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行 和 。
(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好,则需要通过 工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。该工程是一项难度很大的工程,目前成功的例子不多,主要原因是 。
反刍动物的复胃具有四室，前三个室为瘤胃、网胃和瓣胃，总称前胃。前胃的黏膜没有胃腺，食物在前胃内受到机械性消化和微生物消化，第四室皱胃的消化与单胃相似。下图是碳水化合物和蛋白质在瘤胃中的代谢过程，请据图回答：
(1)反刍动物的瘤胃内生活着大量的微生物，多数微生物的代谢类型是 ，这些微生物与反刍动物的关系是 。
(2)瘤胃内有些细菌在分解纤维素的同时合成微生物体蛋白，其氮源是 ，根据这一原理，在粗纤维饲料中添加尿素的目的是 。
(3)瘤胃是一个良好的微生物发酵罐，与工业发酵罐相比，主要优点是 。谷氨酸发酵过程中的搅拌与反刍动物瘤胃蠕动相比，不同的是 。
(4)瘤胃中的微生物进入皱胃和小肠后，能够被消化吸收和利用。所以，瘤胃的发酵“产品”之一——“微生物”，相当于发酵工业产品中的 。用工程菌进行发酵生产时，为防止人工合成的生物新种扩散，应对排出的废液、设备等进行 。
植物甲、乙是两种濒危药用植物(二倍体)。请按要求回答问题：
(1)以植物甲、乙的茎尖和叶片为材料，通过组织培养获得了再生植株，解决了自然繁殖率低的问题。这表明植物细胞具有 。由叶片等材料形成的愈伤组织的形态结构特点是 。
(2)图l和图2分别是植物甲、乙的萌发花粉粒和来受精胚珠的示意图。
在分离珠被细胞的原生质体时，通常使用纤维素酶和果胶酶破除细胞壁，其原理是利用了酶的 性。如果将图1中的1个精子与图2中的1个 细胞或2个 融合，可培育出三倍体植株。用适当浓度的秋水仙素处理该三倍体植株的幼苗，可能获得药用成分较高的六倍体植株。秋水仙素的作用机理是 。
小鼠的骨髓瘤细胞是生物科研的重要材料之一，请分析回答以下问题：
Ⅰ．已知细胞合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。
(1)试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
(2)为了从培养液中分离出杂种细胞，可以在培养液中加入氨基嘌呤，这是因为：①淋巴细胞本身 ；②骨髓瘤细胞及其融合细胞 ；③淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后能增殖的原因是利用 途径合成DNA。
Ⅱ．为了能在体外获得大量的干扰素，有人进行了实验，可是当将T淋巴细胞在体外培养繁殖了几代后，细胞分裂就停止了。
(3)请你用细胞工程的方法，以小鼠为实验对象，提出一个既能使T淋巴细胞在体外培养繁殖，又能获得大量小鼠干扰素的实验设计思路。 。
下图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题
(1)制备单克隆抗体的步骤：
①将 注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。
②将B淋巴细胞瘤细胞系在 培养基中培养。
③将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的B淋巴细胞瘤突变细胞系在 的诱导下融合，放在多孔培养板上培养。
④这样获得的杂交瘤细胞具有B淋巴细胞系有 的能力，又具有 的本领。
⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放 个细胞进行培养。
⑥阳性细胞不断繁殖，制备出抗该抗原的单克隆抗体。
(2)单克隆抗体比一般的血清抗体的优点是 ，单克隆抗体是由同样的抗体分子组成，每个抗体分子带有 的抗原结合部位，单克隆抗体可以识别分子的特殊部位，使单抗体具有 。
(3)用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的 细胞制备的，其化学本质是 ，对人类有 和免疫原性。
(4)在多孔培养板中生长的细胞共有5种类型，其中杂种类型有2种，我们所需要的杂交瘤细胞是 融合而成的细胞。
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