萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α—淀粉酶和β—淀粉酶。α—淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β—淀粉酶不耐热,在70℃ 15 min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。请协助完成“测定小麦种子中α—淀粉酶催化效率”的实验。
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器:1 mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液,取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2 min,取出后按试管号顺序排列。
试剂
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试管号
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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7
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麦芽糖标 准液(mL)
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0
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0.2
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0.6
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1.0
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1.4
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1.6
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2.0
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蒸馏水(mL)
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2.0
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麦芽糖含量(mg)
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0
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0.2
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0.6
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1.0
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1.4
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1.6
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2.0
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斐林试剂(mL)
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2.0
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2.0
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2.0
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2.0
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2.0
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2.0
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2.0
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步骤二:制备酶液。
―→―→
步骤三: 。
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略少量的麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10 min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10 min。
步骤五: 。
结果分析:将A试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α—淀粉酶催化效率。
分析上述步骤回答:
(1)步骤一的2~7试管中加入蒸馏水的量分别是 (单位mL)。
(2)实验中B试管所起的具体作用是 。