菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花,培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答:
(注:卡那霉素抗性基因(KanR为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感)
(l)质粒是基因工程中最常用的载体,其化学本质是 ,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。
(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是 ,连接它们所需要的基本工具是 。
(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用 处理;使其处于感受态。
(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及 的固体培养基中,在适宜条件下进行培养,筛选转基因菊花。
(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时,需根据抗虫基因(目的基因)两端的部分碱基序列设计特异引物,若其中一种引物共用了31个,则目的基因最多扩增了 次。
(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫,实验结果如下表所示。请据表回答:
①对照组应饲喂等量的 。
②据表分析, 差异显著,说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。