14分)、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示,请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状)的来源属于______ 。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制,也不能______ 。
(3)在构建重组质粒时,应选用______ 和_____ _两种酶对______ 和_____ _进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有______ 、_____ _。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是______ 菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的______ 作探针进行分子杂交检测,又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从 水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______ 技术,愈伤组织经______ 进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加 。