香蕉果实中的淀粉酶可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种,其中β-淀粉酶不耐热,在温度70℃以上易钝化,而α-淀粉酶耐热。测定不同成熟度的香蕉中两种淀粉酶的活性,对研究香蕉的保鲜具有重要意义。请完成以下的实验方案。
实验目的:测定一定成熟度香蕉果实中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性
实验原理:α-淀粉酶和β-淀粉酶都能将淀粉分解为麦芽糖,通过特定方法测定麦芽糖的含量。以5分钟内每克样品水解产生麦芽糖的毫克数表示酶活性的大小。
实验方法
⑴.酶液的制备:称取香蕉果肉2克(含外壳),加适量水置研钵中研磨成匀浆。将匀浆转入离心管中,搅拌均匀后离心,将上清液转入100mL容量瓶,用水定容至刻度,得粗酶液。
⑵.首先将粗酶液分装到两支试管,甲试管酶液进行70℃±0.5℃恒温水浴中准确加热处理15分钟后,乙试管酶液置于40℃水浴中。
⑶.取试管三个,编号,按下表加入各液:(在答案卷填写1、2号实验组所缺的内容)
试剂 组别
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1%可溶性淀粉液
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酶液
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对照组
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0 mL
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1 mL乙试管酶液
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1号实验组(测α-淀粉酶活性)
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2 mL
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?
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2号实验组(测总淀粉酶活性)
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2 mL
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?
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将以上各管试剂混匀后,置40℃水浴准确保温5分钟,取出后立即向1、2、3号试管中加入4mL 0.4mol/L NaOH,以终止反应。
⑷.测定各试管麦牙糖含量,计算总淀粉酶活性酶活性、α-淀粉酶活性和β-淀粉酶活性(如α-淀粉酶活性=实验组1测定值—对照组测定值。其他具体方法略)回答问题:
a作为对照组,另一种做法是加入淀粉液但不加酶液,两者相比较,现行做法的优点是______________________________________。
b实验所测得β-淀粉酶活性=___________________________________。