由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。
（1）图甲中，过程①需要的酶有____ __。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以______作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是___ __。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_______菌的发酵罐需要先排气，其原因是_____ _____________________。
（4）若要对培养液中的酵母菌进行计数，下表是取0.1ml菌液进行涂布时，不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数：
| 稀释倍数 |
103 |
104 |
105 |
|
| 重复 实验 |
1 |
1498 |
126 |
12 |
| 2 |
1208 |
128 |
9 |
|
| 3 |
1189 |
133 |
6 |
根据表中数据估算培养液中酵母菌的浓度约为_______ 个/ml
下图1是测量枪乌贼神经纤维膜内外电位的装置，图2是测得的动作电位变化。图3为反射弧中神经—肌肉接头的结构及其生理变化示意图。请回答：
（1）图1状态测得的电位相当于图2中的 区段的电位。若该神经纤维接受突触前膜释放的是抑制性递质，则图1的指针有何变化 （填向左、向右、不变）。
（2）图2中由于Na+内流引起的是 区段。枪乌贼的神经细胞在发生去极化时细胞外 （填“钠”或“钾”）离子多。如果降低细胞外液中钠离子浓度，动作电位振幅 （填“降低”或“升高”或“不变”）。
（3）以枪乌贼的粗大神经纤维作材料，如下图所示，在神经纤维的表面，放置两个相距2～3cm的电极a和b，在图中的刺激点给予较强的电刺激。依据观测到的电流表指针偏转情况所绘出的曲线是（ ）
（4）发生反射时，神经中枢产生的兴奋沿________神经传到突触前膜，导致突触小泡与前膜_________，释放神经递质（Ach）；Ach与Ach受体结合后，肌膜发生__________，引起肌肉收缩。
为研究复合氨基酸对小球藻（单细胞藻类）的种群增长的影响，进行了不同浓度复合氨基酸对其叶绿素含量、氧气释放量、细胞数量影响的实验，结果见下表。
| 复合氨基酸 （mg/L） |
叶绿素含量 （μg/mL） |
氧气释放量 （mg/L） |
细胞数倍增的时间（天） |
| 0（对照） |
0.11 |
6.85 |
5.8 |
| 2.3 |
0.14 |
8.67 |
5.5 |
| 11.1 |
0.25 |
9.21 |
4.9 |
| 12.5 |
0.22 |
7.56 |
5.7 |
| 20.8 |
0.12 |
7.34 |
8.4 |
注：每2天测量叶绿素含量、氧气释放量和细胞数；表中叶绿素含量、氧气释放量为第10天数据。
请据表分析回答：
（1）在叶绿素a含量检测时，将小球藻烘干、粉碎后，加入___________制成色素提取液，进行测量；在细胞数量检测时，需将小球藻培养液滴到_____________，并在显微镜高倍镜下镜检计数。
（2）表中氧气释放量________（“＞”、“＝”、“＜”）小球藻叶绿体产生的氧气量，O2产生于叶绿体的 （结构）。
（3）表中数据说明，添加了复合氨基酸后，小球藻_______________增加，促进光能吸收，光反应产生的_________增加，加快CO2被还原为____________的速率。
（4）表中数据说明，复合氨基酸的浓度和小球藻种群增长的关系是_________________。
应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
(1)②过程常用的方法是 。要检测目的基因是否翻译成了人生长激素，利用的技术是 。
(2)转基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,则说明基因工程能够突破自然界生物的 。基因表达载体中,人生长激素基因的前端必须有 ，使人生长激素基因在乳腺细胞中特异性高效表达。
(3)在抗虫棉培育过程中, ④过程常用的方法是农杆菌转化法，是利用农杆菌会被棉花植株伤口处细胞分泌的 吸引并移向这些细胞，而且Ti质粒有 的特点。
(13分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答:
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?
（2）③④⑤过程是 技术，通过该过程可在体外获得大量目的基因，它是利用 的原理。利用该技术扩增目的基因的前提是 ，以便合成引物。若③④⑤过程连续进行4次，需要消耗引物 个。
（3）过程⑧是 ，并使其在细胞内 的过程称为转化。为使过程⑧更易进行，可用 处理D。使D处于一种 生理状态。
（4）在利用AB获得C的过程是基因工程的核心，最终形成的C应该含有基本元件 。
（5）最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可进行分子水平的检测，可检测的物质有_____________ __________________ 三种。
(12分)下图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoR Ⅰ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8 Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度。请据图回答：
（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是 、 。
（2）如果是两两重组，可能有 种长度的重组结果。
（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用 酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和 kb，或者 kb和 kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）。
（4）将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是 （多选）。
A.质粒 B.动物病毒 C.噬菌体 D.植物病毒
（5）为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在培养基上培养，得到如图示1的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含 的培养基上培养，得到如图2的结果（空圈表示与图1对照无菌落的位置），挑选目的菌的位置为 。
（6）PvuⅠ能识别的序列和切点是–G↓GATCC–请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。
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