科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：
（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶 分别对 进行切割，切割后产生的DNA片段分别为 种。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有 作为标记基因。
（3）研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。
（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的 过程。
（每空2分，共10分）南瓜的果实形状有球形、扁形和长形三种，受两对等位基因A、a和B、b控制。现将两纯种球形果实的南瓜进行杂交，结果如下图:
请分析回答：
（1）纯种球形南瓜的基因型是 和 。
（2）F1扁形南瓜产生的配子种类及比例是_________________。
（3）F2球形南瓜中杂合子的基因型是_________________________________________。
（4）从F2可知，当基因 存在时，就表现为扁形果实。
（每空1分，共10分）基础知识填空：
（1）基因自由组合定律的实质是：杂合子在减数分裂形成配子的过程中，_______________随同源染色体的分开而分离，__________________________自由组合。
（2）DNA分子的_________________为复制提供了精确的模板，通过_________________保证了复制的准确性。
（3）DNA上 的千变万化，构成了DNA分子的多样性；基因是__________
______的DNA片段。
（4）生物性状的表现是受_________________和_________________共同作用的结果。
（5）基因通过控制______________来控制代谢过程，进而控制生物体的性状；基因还能通过控制______________直接控制生物体的性状。
请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：
（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶
体内含有的＿＿＿＿＿能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。
（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于＿＿＿＿＿卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂＿＿＿＿＿期时，才具备受精能力。哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在＿＿＿＿＿时完成的，这是精子和卵细胞在发生上的重要区别。
（3）体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿两种。
由李建远教授率领的科研团队，在山东省烟台毓璜顶医院成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。实验流程如下（字母表示操作技术或生理过程）：
（1）A过程中，采取的关键措施是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）B过程中，李建远教授采用三维立体偏震光纺锤体成像系统，对核DNA精确定位后，再用微激光对卵子的某一结构打孔，才能精确剔除卵细胞核。这一结构主要是指( )
| A．放射冠 | B．透明带 | C．卵黄膜 | D．核膜 |
（3）在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时，往往会发生细胞接触抑制现象，需要用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等处理。培养过程中除了保证无菌、无毒的环境外，为了防止培养过程中的污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）B过程中处理的卵细胞是处于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿时期的细胞。
（5）C表示核移植，D过程往往需要使用物理或化学方法激活，其中完成的细胞增殖方式是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（6）通过克隆胚胎进而用其衍生而来器官，来取代患者本人病变的器官，就会避免免疫排异反应的发生，根本原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。若用该克隆胚胎细胞进行治疗性克隆，则将目的基因导入细胞最为有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（7）在上述的实验过程中涉及到动物细胞工程。在动物细胞工程常用的技术手段中，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术是其他动物细胞
工程技术的基础。
下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答：
番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。（操作流程如图）
（1）过程①中切割抗多聚半乳糖醛酸酶基因需要的工具酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿,其特点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿, ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；除此之外还需要的工具酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
（4）培养②、③为植物组织培养过程中的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(5) 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，将目的基因导入受体细胞，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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