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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 中等
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素-2(IL-2)。该蛋白为淋巴因子,可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。技术流程如图。请回答:

(1)从健康人外周血分离得到的单核细胞,应置于      气体环境中,并在适宜温度和pH条件下培养48h。培养液中通常要加      等天然成分。提取细胞总RNA生成cDNA。图中PCR过程的模板是      ,该过程使用的酶是             
(2)表达载体1中的位点a应含有图中      酶的识别序列,才能成功构建表达载体2。
(3)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有     密码,才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白。
(4)将表达载体2导入酵母细胞,在培养液中培养一段时间后离心,取      (上清液/菌体)进行产物鉴定。鉴定方法是      
(5)若希望白细胞介素-2(IL-2)在体内不易被降解,则需要通过      工程手段对合成白细胞介素-2的相关目的基因进行设计,该工程是一项难度很大的工程,目前成功的例 子不多,主要原因是        

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人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL2)。该蛋白为淋巴因