苏云金芽孢杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),据图回答下列问题。
(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有________种DNA片段。
(2)基因工程的核心步骤是____________________。
(3)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程,此过程可获得________种重组质粒;如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切,目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。用BstⅠ与BamHⅠ酶切后的目的基因片段含有________个游离的磷酸基团。
(4)目的基因插入质粒后,不能影响质粒的_____________________。
(5)重组质粒是否导入受体细胞,在分子水平上的经检测方法是 。
(6)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白,可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞,并防止植物细胞中________对T-DNA的降解。
(7)已知转基因植物中毒素蛋白只与某些昆虫肠上皮细胞表面的特异性受体结合,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解,昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原因是人类肠上皮细胞________________________。
(8)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种,其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。