研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题。
（1）从肝细胞中分离出相应的RNA，经________获得内皮抑素基因，再经________进行扩增，以获得更多的目的基因。
（2）扩增的目的基因与pUC18质粒(如图所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接，还减少了目的基因与目的基因、载体与载体的连接，提高了重组质粒的比例。
（3）大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有________和氨苄青霉素。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成________颜色的菌落，原因是__________________。
（4）从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37 ℃培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72 h后在显微镜下观察细胞存活情况并统计(或记录)活的内皮细胞数目，实验结果如下表所示。
| 粗提表达产物浓度/(μg·mL－1) |
0 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
| 活的内皮细胞数目(×102) |
12 |
6 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
实验结果说明_____________________________________________________
_____________________________________________________________。
下图是以新鲜葡萄为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，请分析并回答：
（1）过程甲若为自然发酵，起主要作用的是附着在葡萄皮上的__________。在葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约 的空间。经过10～12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为 色，说明产生了酒精。
（2）过程乙中使用的微生物是__________，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：
第一步：配制 （固体/液体）培养基。
第二步：对培养基一般使用 （方法）灭菌。
第三步：接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和___________________。
第四步：培养。
第五步：挑选符合要求的 。
（3）用上图发酵装置进行甲、乙过程时温度设置和充气口处理有何不同？
______________________________________。
千百年来，腐乳一直受到人们的喜爱，下面介绍的是绍兴腐乳制作工艺流程：黄豆浸泡→磨浆→离心去渣→煮浆→过滤→埋花→压榨去水→切分成型→排乳→自然发酵→搓毛→加盐腌制→装瓶→加酒水、辣椒→后发酵→贴标→成品。
利用所学生物知识，思考并回答下面几个问题：
（1）现代科学研究表明，许多微生物参与了豆腐的发酵，绍兴腐乳的制作中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ；其产生的脂肪酶能将豆腐中的脂肪水解为 和 。
（2）传统的制作过程中，豆腐块上生长的微生物来自 。
（3）“搓毛”是搓去豆腐表面长出的白毛，豆腐长的白毛是 。
（4）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制__________________________。
某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。
（1）培养基中加入化合物A的目的是 ，这种培养基属于 培养基。
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是 。
（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是 。
（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是 ，操作时采用 灭菌的方法。
（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 。
（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是 ，此对照实验的目的是 过程中是否被杂菌污染。
甘蔗含糖量高,是生产燃料酒精的优质材料。为了提高酒精产量，需要优质甘蔗品种和具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌作为理想的酒精发酵菌种。根据所学知识回答下面的问题。
(1)如果要用甘蔗的外植体作为材料对甘蔗进行大规模种植，在对甘蔗外植体细胞进行接种前，需要进行 ， 两项工作。
(2)在外植体培养获得幼苗的过程中，需要 与 等激素的作用。
(3)为了获得理想的酵母菌菌种，可以对野生菌种进行 。然后在
| A．固体 | B．液体 | C．选择 | D．鉴别) |
培养基上进行培养，该培养基要比基本培养基额外添加 ，在该培养基中挑选 菌落，即为耐高糖、耐酸特性的突变酵母菌。
(4)植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别是 。某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是 。
普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的
淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母茵菌种(过程如图甲所示)。
(1)图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是________________。
(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学
的接种方法是___________________；推测该同学接种时可能的操作失误是_______。
(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种______菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。
(4)用凝胶色谱法分离淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_______。
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