根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和T4DNA连接酶。
（3）反转录作用的模板是 ，产物是 。若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术。
（4）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体。
（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 。
果实在成熟过程中会出现以下一些生理现象：出现一个呼吸速率迅速上升的阶段，果皮由绿色逐渐变为红色或黄色，果实中的贮藏物不断代谢转化，果实甜味逐渐增加，果肉逐渐软化，根据这些现象，请回答下列相关问题。
（1）果实由硬变软的原因：果肉细胞中具有支持和保护作用的结构是 ，该结构中的某些成分被相应的酶催化水解，如 和 酶。
（2）果肉变甜是因为 （A．多糖 B．可溶性糖）积累的结果，这类物质是由 水解产生的，可通过实验检验果实成熟过程中这两种物质的含量变化，若要检验反应物常选择碘液做试剂，也可选择 检验产物，现象是出现 。
（3）果皮颜色的变化是因为 分解，表明该种色素分子结构不稳定。
（4）水果储藏时可选择 、 的环境条件，目的是降低细胞的 ，使水果保持较好的口感。右图表示果实在不同O2浓度下的CO2释放量和O2吸收量的变化，由图可知果实储藏时应选取____点所对应的O2浓度，理由是 。若密闭储存，果实易腐烂，原因是 。
下图表示真核细胞亚显微结构模式图。
（1）图A属于_____（填“植物”或“动物”）细胞，其主要依据是____________。
（2）图A中具有双层膜结构的细胞器是[ ] ，它是细胞进行 的主要场所。细胞内膜面积最大的细胞器是[ ] ；真核与原核细胞共有的细胞器是[ ] _； 在动植物细胞中功能不同的细胞器是[ ]_ _ _。
（3）图B所示的细胞若是植物的根尖细胞，不应含有的细胞器是[ ]___ _____；若是低等植物的细胞，还应具有的细胞器是[ ]_ __ ；若是紫色洋葱鳞叶表皮细胞，紫色色素存在于[ ] 中。
（4）为研究细胞内各种组成成分和功能，需将细胞器分离。分离各种细胞器常用的方法是 。
下图为物质出入细胞膜的示意图，请据图回答：
（1）目前为大多数人接受的生物膜分子结构模型是桑格和尼克森提出的生物膜的____模型，其中A代表 分子； B代表 ； D代表 ；
（２）当动物细胞吸水膨胀时B的厚度变小，这说明B具有 ；细胞膜从功能上来说，它是一层 膜。若要制备纯净的细胞膜，常用的细胞是 ，因为这种细胞 。
（3）a b c d e表示物质跨膜运输的方式，其中属于被动运输的是 判断理由是 ，而 表示的是主动运输，其中 可表示小肠上皮细胞吸收葡萄糖的过程。
就下列实验，回答有关问题。
（1）在脂肪的鉴定中，常用体积分数为50％的酒精溶液洗去浮色，这是因为 。
（2）在盛有10ml 3%过氧化氢溶液的试管中，加入新鲜的发芽的小麦种子研磨液时，试管中有大量气泡生成，将点燃的卫生香插入试管，火焰变得明亮，这个实验证明发芽的小麦种子中含有 。
（3）若利用小麦的根毛细胞进行质壁分离实验，由于观察的细胞无色透明，为了取得更好的观察效果，调节显微镜的措施是 。
（4）某同学用0．5g／mL的蔗糖溶液做植物细胞的质壁分离与复原实验，结果是质壁分离明显，但不能复原，原因是 。
（5）如图所示是在高倍显微镜下观察到的黑藻叶细胞的细胞质环流示意图（图中的箭头表示细胞质环流方向），回答下列问题：
①为了看到细胞质处于不断流动状态，最好选图中的____作为参照物。
②根据图中细胞核位置和箭头方向可知，实际上黑藻细胞中细胞核的位置和细胞质环流的方向分别为 。
| A．细胞核位于液泡的右方，细胞质环流的方向为逆时针 |
| B．细胞核位于液泡的左方，细胞质环流的方向为逆时针 |
| C．细胞核位于液泡的右方，细胞质环流的方向为顺时针 |
| D．细胞核位于液泡的左方，细胞质环流的方向为顺时针 |
③为什么黑藻叶片是做细胞质流动的观察实验的理想材料？____________、 。
褪黑素(MLT)是机体分泌的一种激素，主要通过下丘脑-垂体-性腺轴对动物生殖产生一定影响。
（1）机体内的MLT由腺体分泌后，经 运输到下丘脑，对下丘脑分泌的 激素产生影响，进而影响垂体细胞对催乳素(PRL)和促黄体素（LH）等相关促性腺激素的分泌。
（2）科研人员通过体外培养，研究单独使用不同浓度MLT以及不同浓度MLT和hCG（人绒毛膜促性腺激素）共同使用对蒙古母羊垂体细胞分泌激素的影响。实验过程中每24小时更换一次培养液，并且分别在24h时、48h时测定激素含量，结果如下。
| 结果 处理 |
LH含量(mIU/ml) |
PRL含量(uIU/ml) |
||
| 24h时 |
48h时 |
24h时 |
48h时 |
|
| 对照组（只用细胞培养液培养） |
15.79 |
14.78 |
127.74 |
115.61 |
| 10 pg/ ml的MLT |
15.28 |
15.51 |
85.77 |
91.55 |
| 100 pg/ ml的MLT |
13.40 |
14.39 |
93.53 |
96.32 |
| 1000 pg/ ml的MLT |
14.04 |
14.56 |
96.69 |
98.87 |
| 10 IU/ml的hCG |
167.26 26 |
153.55 |
95.21 |
94.50 |
| 10 pg/ ml的MLT十10 IU/ml的hCG |
149.40 |
165.72 |
74.3 |
88.20 |
| 100 pg/ ml的MLT十10 IU/ml的hCG |
170.70 |
155.80 |
79.95 |
101.50 |
| 1000 pg/ ml的MLT十10 IU/ml的hCG |
155.71 |
156.96 |
107.61 |
111.97 |
分析上述实验结果可以看出：
①单独使用MLT处理时，对垂体细胞分泌LH的影响不显著，而加入hCG后该激素的分泌 ，但与MLT的 无明显关系。可能的原因是动物体内的垂体细胞分泌LH受雌激素含量的 调节，MLT可通过影响血液中雌激素含量间接影响垂体分泌LH。而本实验是体外培养垂体细胞，只加入MLT没加雌激素，因此对LH的分泌影响不大。
②单独添加MLT或hCG后各组垂体细胞分泌PRL的含量 对照组，表明MLT或hCG 垂体细胞分泌PRL。当用MLT和hCG共同作用于垂体细胞时，随着 ，PRL的分泌呈增长趋势，表明MLT和hCG可相互作用，从而影响PRL的分泌。
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