科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：
（1）过程①所需要的酶是 。
（2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶 切割质粒，用限制性核酸
内切酶 切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________ 原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是 。
（3）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大 的通透性，使含有
目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
（4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了 ，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是 ，这些细菌中导入了________________。
（5）图中的重组质粒的组成除了目的基因、标记基因外，还必须有 、
(8分)科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答下列问题。
(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与 融合,形
成 细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点于 ,可大量制备。
(2)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用 诱导融合。
(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是 。
(4)为了能确定目的基因已经导入鼠淋巴细胞中，相应的载体需要有 以便于进行检测；改造抗体属于 工程的范畴。
(11分)阅读如下资料:
资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题。
(1)资料甲属于基因工程的范畴。为了获得目的基因的大量拷贝，需要通过 技术来扩增目的基因；将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是 。
(2)资料乙中的技术属于 工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对 进行改造,或制造一种 的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。
(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到 种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为 体,兔乙称为 体。
下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：
(1)选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用________期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过________来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，对于花粉细胞核不容易着色的植物常用的染色剂是________。
(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中________________。
(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度___的薄壁细胞。胚状体与_____发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。
(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶。
________________(填编号)需要灭菌，______________(填编号)需要消毒。
(5)从消毒后的玫瑰花中分离几个花药，按严格的无菌操作要求接种到培养基上，并将每个花药捣碎，使其中的花粉释放出来。经过适宜培养，得到的试管苗是否可育？为什么？
___________________________________________________________________________。
1917年布里奇斯发现了一种翅膀后端边缘缺刻（缺刻翅）的红眼雌果蝇，并用这种果蝇做了下图1所示的实验。后经进一步的实验证实，控制翅型的基因位于X染色体上，Y染色体上没有其等位基因。 请据图分析并回答下列问题：
（1）布里奇斯认为，缺刻翅形成的原因不可能是基因突变，理由是：①若为显性突变，则后代中应该还有表现型为 果蝇出现；②若为隐性突变，则后代不可能出现的表现型为 。
（2）布里奇斯推测，“X染色体片段缺失”是导致图1所示实验现象的根本原因。为了证实这一猜测，应对表现型为 果蝇做唾液腺染色体的高倍镜检查，若在高倍镜下观察到上图2所示的 的现象，即可证实布里奇斯的猜测。
（3）现代遗传学研究发现，因缺刻翅果蝇不能产生Notch受体，从而影响翅的正常发育。翅形基因对性状的控制表明，基因可通过 来直接控制生物体的性状。
（4）已知果蝇红眼（基因B)对白眼（基因b为显性。下列有关对图1实验现象的解释正确的是
A．亲代的缺刻翅红眼雌果蝇不含白眼基因
B．亲本缺失片段恰好位于X染色体上红眼基因所在的区段
C．F1缺刻翅白眼雌蝇的一条X染色体片段缺失，另一条X染色体带有白眼基因
D.果蝇的缺刻翅性状的遗传方式为伴X染色体隐性遗传
（5）研究表明，果蝇缺刻翅有纯合致死效应。用缺刻翅雌果蝇与正常翅雄果蝇杂交，然后让F1中雌雄果蝇自由交配得F2，F1中雌雄果蝇比例为 ，F2中缺刻翅：正常翅= ，F2中雄果蝇个体占 。
λ噬菌体有极强的侵染能力，并能在细菌中快速地进行DNA的复制，最终导致细菌破裂（称为溶菌状态），或者整合到细菌基因组中潜伏起来，不产生子代噬菌体（称为溶原状态）。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体，使其在受体细菌中大量扩增外源DNA，进而构建基因文库。相关操作如下图，请分析回答相关问题：
(1)组装噬菌体时，可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36～51 kb，则λgtl0载体可插入的外源DNA的长度范围为 。
(2) λ噬菌体的溶菌状态、溶原状态各有用途。现有一种imm434基因，该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。但如果直接插入该基因，会使载体过大而超过噬菌体蛋白质的包装能力，又需要删除λ噬菌体原有的一些序列。根据上图分析：
A、如果需要获得大量含目的基因的噬菌体，应当使入噬菌体处于 状态，相应的改造措施是删除λ噬菌体DNA中的 （填“左臂”、“中臂”或填“右臂”）；
B、如果需要目的基因在细菌中大量克隆，应当使λ噬菌体处于 状态，相应的改造措施是可以删除λ噬菌体DNA中的 （填“左臂”、“中臂”或填“右臂”），并插入 。
(3)包装用的蛋白质与DNA相比，特有的化学元素是 ，若对其进行标记并做侵染实验，可获得的结论是 。
(4)分离纯化噬菌体重组DNA时，将经培养10 h左右的大肠杆菌——噬菌体的培养液超速离心后，从离心试管内的 中获得噬菌体。
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