美籍华裔科学家钱永键和日本海洋生生学家下村修等人因在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面的突出贡献,获得了2008年诺贝尔化学奖。下图是我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:
(1)图中通过①、②过程形成重组质粒,需要用同一种限制酶切割目的基因和质粒。限制酶的特点是 。
(2)③过程将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是 。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是 。
(4)以上培育过程中应用到的生物技术主要有 、 、 等。(写三项即可)
(5)④过程形成重组细胞时应用 期的卵母细胞,去掉其细胞核的原因是 。