科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答:
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术必须用________酶,所需的原料是______________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如表:
限制酶
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BamHⅠ
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HindⅢ
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EcoRⅠ
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SmaⅠ
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识别序列 及切割位点
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G↓GATCC CCTAGG↑
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AA↓GCTT TTCGAA↑
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GA↓ATTC CTTAAG↑
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CCCG↓GG GGGC↑CC
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用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是______________________________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用____________________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是_____________________________________
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