圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
（1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：
①分别配置 的培养基和 的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；
②分别向A、B培养基接种 ；
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；
④从A、B培养基上生长的 中挑取生长良好的菌株，分别接种到 中；
⑤ 。
（2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
| 反应条件 |
||
| |
温度 |
时间 |
| 变 性 |
95℃ |
30s |
| 复 性 |
55℃ |
30s |
| 延 伸 |
72℃ |
1min |
| 30个循环后 |
适宜 |
5-10min |
| 保 温 |
4℃ |
2h |
| PCR反应体系 |
50ul |
| 缓冲液 |
5ul |
| 脱氧核苷酸 |
1ul |
| 引物A |
0.5ul |
| 引物B |
0.5ul |
| DNA聚合酶 |
0.5U |
| 模板DNA |
1-2ul |
| 加去离子水补足至50 ul |
①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是 。
此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________ ________________。
多数鱼类的体色会随着环境条件的变化而改变，经研究发现，鱼类的眼和松果体能感知光照变化而产生兴奋，当兴奋到达肾上腺时，其分泌的肾上腺素能使体表黑色素细胞的色素颗粒聚集，使体色变浅；而当兴奋到达副交感神经时，其神经末梢分泌的乙酰胆碱能使体表黑色素细胞的色素颗粒扩散，使体表颜色加深。请回答下列问题：
(1)从反射弧角度分析，眼和松果体为 ，其接受刺激产生兴奋，兴奋部位的膜电位表现为 。肾上腺素能被体表黑色素细胞感知，原因 。
(2)乙酰胆碱是一种神经递质，由此推测，副交感神经末梢与体表黑色素细胞接触部位类似于 (结构)，此处信息传递的方向是 (填“双向”或“单向”)的。
(3)鱼体色的调节方式是 。
(4)为验证肾上腺素和乙酰胆碱对鱼体色的影响，科研人员进行了相关实验，请完善下列实验内容。
实验对象：体长约10cm左右且体色相近的同种鲫鱼若干条。
药品及用具：鱼用生理盐水、适宜浓度的肾上腺素、乙酰胆碱、注射器等。
实验步骤：
第一步：将鲫鱼平均分成三组，编号为甲、乙、丙，分别放人三个玻璃缸中置于背光处饲养一段时间。
第二步：给甲组鲫鱼腹腔中注入2mL乙酰胆碱，乙组鲫鱼腹腔中注入 ，而丙组鲫鱼腹腔中注入 作为对照。
第三步：将装有上述处理后鲫鱼的玻璃缸置于 处，约2h后，观察比较三组鲫鱼体表颜色的变化。
预期实验结果：甲、乙、丙三组鱼的体色由浅到深依次是____________。
下表为不同遮光处理对东北铁线莲光合作用影响的结果，图乙为两种条件下东北铁线莲净光合速率日变化曲线，请分析回答问题：
| 遮光比例 (%) |
叶绿素 a/b |
叶绿素含量 (mg/g) |
植株干重 (g) |
| 0 |
4.9 |
2.2 |
7.5 |
| 30 |
4.8 |
2.3 |
9.9 |
| 50 |
5.3 |
2.4 |
9.2 |
| 70 |
4.5 |
2.6 |
7.2 |
| 90 |
4.3 |
3.0 |
4.8 |
(1)遮光比例与叶绿素含量的关系为___________________________。
(2)与遮光比例50%相比，遮光90%条件下植株干重下降的原因________。
(3)由上表可知，提高东北铁线莲产量的主要措施是__________________。
(4)90% 遮光处理避免了强光照和过高温度对植株的不利影响。 请分析图乙中曲线Ⅱ未出现“午休”现象的直接原因是_______________________。与A点相比，B点的C5含量______________。
(5)某同学要初步探究该植物新鲜叶片中色素的种类及相对含量，可依据_______________原理提取色素，采用_______________分离色素。如果滤纸条上的色素带颜色较浅，其原因可能是______________________（至少答2点）。
下图是培育携带外源赖氨酸基因的克隆奶牛的过程示意图，此奶牛分泌的乳法中富含赖氨酸。请据图回答：
（1）a过程若在体外进行，则要对从雄牛A中采集的精子进行 处理。
（2）实施基因工程的核心步骤是 ，c过程将赖氨酸基因导入成纤维细胞常用的方法是 。
（3）目前普遍使用 去核法去除卵细胞中的核。
（4）对选择好的雌牛D和代孕牛E要进行 处理。
孔雀鱼是一种热带淡水鱼。某一育种专家在众多的孔雀鱼中发现一条身体后半部为暗色的个体，形似“礼服”，并以此个体为基础培育出了“礼服”品种，并做了如下遗传实验。
（1）控制“礼服”性状基因的出现是 结果。从分子遗传学的角度看，控制孔雀鱼的“无礼服”性状的基因的根本区别是 。
（2）从F2性状分析，孔雀鱼“礼服”性状的遗传 （遵循/不遵循）孟德尔的基因分离定律。
（3）对“礼服”性状的遗传方式进行研究，可采用“假说－演绎法”，作出的假说是：控制礼服性状的基因 。
（4）根据假说推测：F2产生的卵细胞中“礼服”基因和“无礼服”基因的比例为 ，让F2雌雄个体自由交配所得F3的表现型及比例为：雌“礼服”：雄“无礼服”：雄“礼服”：雄“无礼服”= 。
（5）从生物多样性角度分析，“礼服”品种出现，增加了 多样性。
金线莲是一种珍稀中草药，在三明市多外地区均有分布。为确定金线莲人工载培的最佳光照强度，某科研机构利用组织培养快速繁育种苗进行人工载培，并测定人工载培植株的生长情况和光合速率。其实验过程如下：
1．选取长有3－4个叶片的金线莲组织培养苗，随机分为5组，每组48株。
2．将栽有植株的育苗盘分别放置在20、50、100、150、200µmol/（m2·s）光照强度下。
3．在每天6时～22时给予光照、温度为25oC的条件下栽培3个月，测定数据并绘制曲线图如下。
（1）利用组织培养技术快速繁育种苗所依据的原理是 。进行组织培养时选取的材料最好是金线莲的 （芽/叶/茎）。
（2）据图分析，金线莲在 µmol/（m2·s）的光照强度下生长最好，过高光照强度会抑制金线莲生长，原因是随着光照强度增加， 。
（3）本实验测定叶绿素含量时， 在叶绿体色素的提取过程中加入丙酮的目的是 。
（4）如果需要更准确地确定金线莲生长的最适光照强度，根据实验结果分析，应在 µmol/（m2·s）范围内设置多组梯度的光照强度继续进行实验。
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