(11分)．日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：
(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。获取绿色荧光蛋白基因常用的三种方法是______________________________________。
图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和________等。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有__________________等。(至少答出三项)
某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题：
（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基从功能上分属于__________培养基。
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。
（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________________。
（4）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量______________。
（5）转为固体培养时，常采用平板划线的方法进行接种，操作时应对接种工具采用_____________灭菌的方法。
（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________________，此对照实验的目的是_____________________。
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________处理后，才能倒掉。
下图为桑基鱼塘生态系统，它是我国南方各省农村比较常见且行之有效的农业生态系统。据图回答问题。
(1) 构建此模式时所依据的生态学原理主要是_____________________；该生态系统最大的优点是____________________________________。
(2) 流经该生态系统总能量是______________，蚕属于该生态系统的第___________营养级；若要使蚕增重15克，最少需要吃掉桑叶_____________g。沼气池中的微生物的同化作用类型为________________。
（3）人工养殖池塘普通存在由于饵料、鱼类排泄物、换水不及时等引起的水体污染现象。与自然池塘相比，人工养殖池塘生态系统恢复力稳定性___________，水体的N、P含量容易升高，会引起藻类等浮游生物大量繁殖、加之死亡后被微生物分解，引起水体的溶氧量下降，造成鱼类等死亡，进一步破坏了生态系统稳态，这种调节方式称为_______________。
下图是科学家培育试管牛（染色体为2N=60条）的过程示意图，据图回答下列问题：
(1)①过程通常用________________处理，可达到超数排卵的目的。形成卵细胞的场所是_______________，精子是在精巢内产生的，精巢内细胞的染色体数目可为__________条。精子是在受精前精子要经过___________处理，才具有与卵子受精的能力。
(2)②过程常用的方法是_____________________。
（3）过程③进行时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行________处理。受体对移入子宫的外来胚胎基本上________________________，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。过程③若要同时产生多头相同的转基因牛通常用到的技术是_____________。
野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：
(1)②过程常用的促融剂是___________，此过程依据的原理是_____________。
(2)一般在培养基上培养24～28小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过___________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(3)请用文字和箭头表示出④、⑤过程的实验流程______________________________。在此过程中需要加入生长素类和细胞分裂素类激素，前者的作用主要是用于__________________。
(4)若想制备人工种子，则需培养至___________________阶段，取出包裹上人工种皮。利用人工种子繁殖后代属于_________。
（5）无菌技术也是成功诱导出再生植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌_________________________________________________。
①培养基 ②培养皿 ③接种环 ④实验操作者的双手 ⑤三角锥形瓶 ⑥植物材料
基因工程自20世纪70年代兴起后，发展迅猛，成果显著。
Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 _______________________________ 。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为 __________ 。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用______________________技术。
Ⅱ近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
（1）基因工程中，利用PCR技术来________________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为____________，在生物体内需要______________才能完成。图中B 过程的完成需要_______________________________________等条件。
（2）若DNA样品的长度为100个碱基对，且A占15%，则完成三次循环，共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
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