(11分)．日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：
(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。获取绿色荧光蛋白基因常用的三种方法是______________________________________。
图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和________等。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有__________________等。(至少答出三项)
根据下图回答有关问题：
（1）若将甲装置用来探究
是否是光合作用的原料，则还应该再增加一个装置，做法是__________。若用来探究元素X是否为植物的必需矿质元素，则还应该再增加一个装置，做法是____________。
（2）若将甲装置中的1％
溶液换成等量的1％
溶液，则在开始的短暂时间内，植物的叶绿体中
与
相对含量的变化情况是_________。
（3）乙图表示该植物的非绿色器官在不同氧浓度时，释放量和
吸收量的变化。当氧浓度为_______时，无氧呼吸最弱；当氧浓度为b时，无氧呼吸消耗的葡萄糖是有氧呼吸的______倍。
图1是某雌性二倍体生物细胞分裂模式图，图2是该生物细胞核内染色体及DNA相对含量变化的曲线图。据图回答下列问题。（注：横坐标各个区域代表细胞分裂的各个时期，区域的大小和各个时期所需的时间不成比例）
（1）基因的分离定律发生在图2的_____（填标号）时期。
（2）图1所示细胞对应图2的时期是_______，（填标号）该细胞产生的子细胞名称为_______。
（3）图2中含有同源染色体的时期有________（填标号），A点的变化可表示的生理过程为__________，该过程主要体现了细胞膜的__________功能。
（4）图3是某同学绘制的曲线图，但是忘记了标明纵坐标：若纵坐标表示一条染色体中DNA含量，则c到d过程细胞中DNA含量_________；若纵坐标表示一个细胞中DNA的含量，则a到c过程细胞中染色体数目___________。
重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。
(1)引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性 。
(2)在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，必须将引物l、2和引物3、4 置于不同反应系统中，这是因为 。
(3)引物l、引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生 种双链DNA分子。
(4)在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过 次复制。
(5)若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括： 、 、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。
动物肠道内存在有益细菌和有害细菌，有害菌大量繁殖会影响动物生长。在肠道粘膜中有一类小分子多肽，叫抗菌肽，能杀灭多种细菌。
（1）抗菌肽是动物_______免疫的重要组成部分，可以用_______试剂鉴定其化学本质。
（2）抗菌肽在动物体内含量微少且提取困难，通过转基因技术则可以利用酵母菌实现大量生产。在发酵时培养基中至少需加入水、无机盐、________、________等四类物质。
（3）抗菌肽不会使细菌产生耐药性，能否替代抗生素成为新型饲料添加剂呢？研究人员用罗非鱼幼鱼进行了下表所示的实验。据表回答：
| 实验组别 |
A 组 |
B组 |
C组 |
D组 |
E组 |
F组 |
| 在基础饲料中添加物质的量（mg.kg-1） |
抗生素 |
抗菌肽 |
不添加 物质 |
|||
| 100 |
5 |
10 |
20 |
50 |
||
| 初始体重（g） |
10.5 |
10.6 |
10.9 |
10.9 |
10.6 |
10.6 |
| 终末体重（g） |
18.7 |
21.3 |
19.7 |
19.0 |
18.3 |
18.6 |
| 增重率（%） |
77.1 |
99.8 |
82.3 |
75.6 |
71.8 |
75.6 |
①该实验的对照组为_________。
②实验时选择_________相近的健康幼鱼若干，分组饲养56天后，测定每条幼鱼的________。
③抗菌肽的最佳使用浓度为_________。当抗菌肽浓度过高时，罗非鱼增重率降低的原因可能是__________。
Ⅰ.图一表示土壤中镉化物严重污染地区，通过栽种吸镉植物回收镉化物的实验流程；图二表示两种植物对土壤中镉化物吸收能力的测试结果及干物质燃烧的气化温度。已知镉化物的气化温度为420℃。请回答。
（1）如果图中气体过量排放至大气，将加剧 等全球性生态环境问题。部分气体及灰分物质重新进入栽培区再度被利用的过程体现了生态系统的 功能。
（2）两种植物的根对镉化物吸收有差异的具体原因是细胞膜上 。你认为治理并回收镉化物适宜选择的植物是 ，理由有 。
Ⅱ.镉化物大量进入大鼠体内，会损伤其睾丸，同时导致肝细胞染色体异常。
（3）重度镉污染地区，大鼠种群出生率下降，长期来看其种群的年龄组成类型将变为 。
（4）取大鼠肝脏组织，用 酶处理后可进行细胞培养。为判断细胞是否发生染色体数目变化，应选择处于 期的细胞进行观察。
粤公网安备 44130202000953号