血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O₂和部分CO₂的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。

（1）将实验流程补充完整：A为                      ，B为                    。凝胶色谱法的基本原理是根据              而达到蛋白质分离的有效方法。
（2）洗涤红细胞的目的是去除              ，洗涤次数过少，无法除去            ；离心速度过高和时间过长会使                         一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是                        。释放血红蛋白的过程中起作用的是                              。
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7．0）的目的是                                                   。如果红色区带                 ，说明色谱柱制作成功。

（4）右图为填充的凝胶色谱柱，据图回答以下问题：
①自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构由                 替代。
②装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是             。
③洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体         （填“相同”或“不同”），洗脱时，对洗脱液的流速要求是                           。