普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点,质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题:
1.构建重组质粒时,应选用限制酶____________对____________进行切割,以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键,具体说就是____________和____________之间的键。
2.如果目的基因直接注入烟草细胞,一般会被烟草细胞____________。质粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因与质粒由____________酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌,应在其培养基中加入___________,理由是__________________。
4.烟草细胞经_______________形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验:一组在培养基中加30%的蔗糖,另一组不加蔗糖,接种后,每组再分成两个小组,分别在光下和黑暗中培养。1个月后,观察其生长、分化情况,结果见下表:
培养条件 |
加蔗糖 |
不加蔗糖 |
光照 |
正常生长,分化 |
不生长,死亡 |
黑暗 |
只生长,不分化 |
不生长,死亡 |
你能得出什么结论?______________________________________。
5.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是___________________。