酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号 项目
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Ⅰ
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Ⅱ
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Ⅲ
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Ⅳ
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Ⅴ
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Ⅵ
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蒸馏水(mL)
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2
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0
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1
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1
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1
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1
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缓冲液(mL)
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0
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2
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1
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0.5
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0.5
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0.5
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果胶酶液(mL)
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0
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0
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0
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0.5
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0
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0
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蜗牛酶液(mL)
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0
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0
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0
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0
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0.5
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0
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纤维素酶液(mL)
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0
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0
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0
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0
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0
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0.5
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实验结果 (绿色深浅程度)
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-
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-
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-
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+++
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++++
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++
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(注:“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组,其设置意义是 。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 洗涤。
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 。