如图为月季花药离体培养产生花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。

（1）一般来说，在      期，细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。确定花粉发育时期一般用       法染色，然后通过        确定花粉是否处于适宜的发育期。
（2）通过花药培养产生花粉植株，一般有两种途径，即通过胚状体阶段发育为植株和通过愈伤组织发育为植株，通过哪条途径实现，主要取决于培养基中             。
（3）灭菌后的花蕾，在剥离花药时，要彻底去除花丝，这是因为与花丝相连的花药不利于
                  的形成。
（4）若欲获取大量抗性基因导入愈伤组织细胞，可以采用PCR技术。PCR技术利用了    
           原理，通过控制温度来控制DNA双链的解聚与结合。为了避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管等用具在使用前必须进行            。
（5）微生物的实验室培养与以上植物组织培养过程不同，但也需要非常严格的操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)操作称为              ，常用的消毒方法有                                          等方法(答出三种)。