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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 较易
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下面是在农杆菌Ti质粒基础上构建的植物抗虫基因表达载体的示意图。请据图回答:

(1)为了扩大基因表达载体的数量,需将基因表达载体再植入农杆菌中并对农杆菌进行培养,此时,在培养农杆菌的培养基中应加入             ,该培养基按用途划分属于
(2)带有抗虫基因的农杆菌进入棉花细胞后,要检测抗虫基因是否插入到棉花的染色体DNA上,常用的方法是              ;要检测抗虫基因在棉花体内是否翻译成蛋白质,必需先从转基因棉花中提取蛋白质,再用相应的  方法来确定是否已形成毒蛋白;如果在个体水平上鉴定抗虫基因是否转化成功,可以通过  实验来实现。
(3)Ti质粒的分子大小有200kb(千碱基对)左右,然而能进入植物细胞的只有一小部分约25kb(称为T—DNA)。在这一小部分的两端各有一个25bp(碱基对)长的重复序列LB和RB,这两个序列对这一小部分DNA进入植物细胞是不可缺少的。实验证明只要Ti质粒上保留了这两个序列,即使这两个序列之间的其它序列被不同程度地改变(如插入一个外源DNA片段),这一小部分也仍然可以转移并整合到植物的基因组中。
① 在构建的T—DNA过程中,还应该具有和 等结构,才能保证进入植物体的抗虫基因能够顺利表达。
②Ti质粒不同于其它质粒的最大特点就是它含有T—DNA,如果给你一个不含T—DNA的质粒,你如何把它构建成含有T—DNA的质粒?              

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下面是在农杆菌Ti质粒基础上构建的植物抗虫基因表达载体的示意