下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答。

（1）在基因工程操作程序中，图中①②表示       ，⑦表示      ，⑧表示         ，⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是         。
（2）过程②必需的酶是        酶。过程③是DNA受热            后解链为单链，③④⑤表示的PCR技术需要的条件有：模板DNA、四种脱氧核苷酸、         、      、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。
（3）在利用A和B获得C的过程中，必须用     切割A和B，使它们产生            ，再加入         ，才可以形成C。
（4）基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是    。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质，进行            ，观察是否产生杂交带。
（5）为使过程⑧更易进行，可用Ca²⁺处理D，使其成为      细胞。