为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
| 已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对） |
第一步水解 |
产物 （单位bp） |
第二步水解 |
产物 （单位bp） |
| A酶切割 |
2100 |
将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割 |
1900 200 |
|
| 1400 |
800 600 |
|||
| 1000 |
1000 |
|||
| 500 |
500 |
|||
| B酶切割 |
2500 |
将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割 |
1900 600 |
|
| 1300 |
800 500 |
|||
| 1200 |
1000 200 |
|||
| 经A酶和B酶同时切割 |
1900 1000 800 600 500 200 |
（1）该实验设计主要体现了__________________原则。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和____个。
（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
 |
（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后 和 序列明显增多。
下面为体液免疫过程，据图回答问题
（1）图中属于体液免疫的反应阶段的是______________（填编号）
（2）G过程主要在____________中进行
（3）若抗原物质是酿脓链球菌，常常会累及心肌细胞，原因是_____ _____________
（4）记忆B细胞和效应B细胞的区别在于________________________
下图表示某地区农业生态系统的结构模式图。请据图回答： 
（1）人们通常将大豆和玉米实施套种，大豆和玉米之间的关系为 ，该生态系统的主要成分是 。
（2）秸秆在沼气池中处理成沼渣后肥效提高，这是因为 。（3）为了提高蔬菜产量，人们通常将蘑菇房与蔬菜大棚相通，原因是 。
（4）该生态系统充分利用了废弃物中能量，形成“无废弃物农业”，遵循了生态工程的
原理。
（5）假设该农场将生产玉米的1/3作为饲料养鸡，2/3供人食用，生产出的鸡供人食用。现调整为2/3的玉米养鸡，1/3供人食用，生产出的鸡仍供人食用。理论上，该农场供养的人数将 （增加、减少）。
（6）废弃农田上会发生群落的演替，该演替的类型是 。农田中经常发生虫害，若调查该农田某种害虫虫卵的密度应采用的方法是 。若农田内有害虫发生，采用何种措施既能保护环境又能有效防治害虫？（写出两点）
Ⅰ下图是植物组织培养的简略表示。请据此回答：
（1）若①是胡萝卜的根尖细胞,则培养的④的叶片的颜色是 ，这说明根尖细胞 。
（2）若利用此技术制造治疗烫伤的药物——紫草素,培养将进行到(填编号) 。若想制作人工种子,应该选用(填编号) 。
（3）“人工种子”中，包埋胚状体的胶质可看作玉米种子的哪个结构？
（4）由“人工种子”萌发出的植株是否可育？
。
Ⅱ 自然界的细胞融合可以产生有性后代；细胞工程中细胞杂交被广泛用于培育杂种植株和生产单克隆抗体等方面。
（1）若a、b是两种植物的体细胞，则要形成d细胞，必须使用 去掉细胞壁。d细胞形成体细胞杂种植株利用了细胞的 ，使用的技术是植物组织培养，组织培养过程的芽分化培养基中细胞分裂素与生长素的比值与生根培养基的相比要 。
（2）若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞能产生单克隆抗体是因为它同时继承了骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的 。
（3）若f中部分细胞已失去分裂能力，则其细胞内遗传信息的传递方向为
。
请回答胚胎工程方面的问题：
（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、 、__________________以及在母体中发育和产出等过程。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和 。
（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是 。
（4）胚胎干细胞（又称为ES细胞）除来源于早期胚胎外，还可来于 。
（5）胚胎干细胞在体外培养过程中，必须在含有5％CO2的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是 ；胚胎干细胞在体外诱导可以定向分化成各种类型的细胞，利用分子杂交技术可以检测细胞分化过程中遗传物质不变，只是表达的基因不同。请简述其检测过程
。
（6）通过ES细胞培育出的人造器官，在临床应用上的最大优点是解决了移植器官和患者之间的 问题。
材料：玉米的光合效率较水稻的高，这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）有很大的关系。如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课题之一。但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中，为快速改良水稻的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径。
（1）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交的原因是 。
（2）获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，以获得重组质粒，需要的工具酶是 。
（3）用含有重组质粒的土壤农杆菌感染水稻细胞，即使感染成功，PEPC基因通过一定途径整合到水稻的基因组中，但不一定会表达，原因最可能是（ ）
A．玉米和水稻不共用一套密码子
B．水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸
C．PEPC基因受到水稻基因组中相邻基因的影响
D．整合到水稻基因组中的PEPC基因被水稻的某种酶破坏了
（4）PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是 。
（5）得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后，科研人员常采用 方法获得转基因水稻植株。
（6）若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：牛乳腺蛋白基因的启动子、 、_________________、终止子和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是 （显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是 （受精卵、乳腺细胞）。
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