人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。己知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图，请回答：
（1）①过程所用的工具酶是
（2）过程②的目的是 即获得Y
（3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 ，X应该具备的特点是 和 ，获得所需X至少经过 次筛选。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。
某质粒上有Sal I、HindIII、BamH I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题．
(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用 催化连接后，两个DNA片段的连接结果有 种。
(2)在构建重组质粒时，应选用 两种酶对 进行切割，
以保证重组DNA序列的唯一性。
(3)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入 ，理由是 。
(4)将转人抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 技术，愈
伤组织经 进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培
养基中添加 。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长，下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答问题。
（1）A过程至多需要的酶有______________种。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的三个条件是①_______________
_______________；②____________________________________；③____________________
_________________________。
（3）如果利用DNA分子杂交原理再生植株进行检测，D过程应该用________________
____________________________________________作为探针。
（4）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的转移符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与____________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_____________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占___________________%。
今年甲型H1N1流感在美国、墨西哥等国先后爆发。甲型H1N1流感的传播速度非常快，为防治疫情，各国研究小组纷纷进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作。下面为某研究小组的前期研究工作的简要操作流程图：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 。
（2）实验中常采用PCR扩增得到H基因, PCR过程中使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其主要特点是 。PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？____ ______。
（3）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是 ，其作用部位为两个核苷酸之间的 键。
（4）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用的载体除质粒外还有
等，在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上 的表达。
（5）甲型H1N1流感患者常出现体温升高的症状，人体的体温调节中枢位于 。若某人为甲型H1N1流感疑似患者，在确诊时可从疑似患者体内分离病毒与已知病毒进行
比较。
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应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
（1）①过程用到的工具酶有 。②过程常用的方法是_____。③过程采用的技术是___。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素。在基因表达载体中，人生长激素基因的末端必须含有_______________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用___________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（3）有人发现prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是 细胞，Ⅲ代表的细胞具有___________的特点。
“滔滔”是我国第一例转入人体白蛋白基因的转基因试
管牛，人们利用该转基因奶牛的乳汁能生产人类血清白蛋白。请利用已有知识，回答下列与
该试管牛有关的问题：
（1）科学家需利用 激素，使优质母牛能超数排卵，而后再从卵巢中采集卵子培养。采集优质公牛的成熟精子，需先培养在含肝素等物质的溶液中，目的是使精子 。成熟的卵子和精子在培养液中完成受精。
（2）将人体白蛋白基因导人受精卵中，当受精卵分裂到囊胚期时，需要取滋养层细胞进行 _____________鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。同时还要用基因探针与目的基因杂交，以检测 。
（3）胚胎移植前应保证供体和受体的生理状态相同，所以要对受体牛进行 处理，然后再将胚胎直接移植到受体内，着床、发育、产仔。
（4）“滔滔”发育成熟后，分泌的乳汁中含有人体白蛋白。目的基因的表达过程可表示为
（5）利用克隆技术可使人体白蛋白基因在牛的后代中长期保存，请简述实验设计思路。
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