苦马豆素(SW)因从灰苦马豆中分离出来而得名,被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果。
①将等量的小鼠肝癌Hepal-6细胞悬液,分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中;
②将培养瓶放于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h,静置、去除上清液;
③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液,于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养;
④分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液,观察结果,得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示。
请回答下列问题。
(1)培养箱中5% CO2的作用是______________________________________。
(2)处于间期的肝癌Hepal-6细胞,其分子水平的主要变化是________________________________________________________________。
(3)步骤③中需要设置对照组,对照组的处理方法应为________。步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养,计数后统计平均值,这是为了________________,使实验结果更准确。
(4)分析图中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是①______________________________________________________________;
②__________________________________________________________。
(5)将培养48 h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到培养48 h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示:
SW
|
癌细胞数目
|
凋亡细胞数目
|
Bax蛋白
|
Bcl-2蛋白
|
2/(μg·mL-1)
|
+
|
+++
|
+++++
|
+
|
1/(μg·mL-1)
|
++
|
+++
|
+++
|
++
|
0.5/(μg·mL-1)
|
+++
|
++
|
++
|
+++
|
0/(μg·mL-1)
|
++++
|
+
|
+
|
++++
|
注:“+”的数量表示相对值的多少
据此推测,SW可能是通过诱发癌细胞________来抑制肿瘤生长的,其原因可能是SW促进了癌细胞内________________的表达。