【生物—生物技术实践】
“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”自古酒就与人类生活息息相关。请回答：
（1）人类使用酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌，酵母菌繁殖的最适温度是 ；酒精发酵一般将温度控制在 。
（2）葡萄酒呈现深红色的原因是 。
（3）现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取
的措施是 ，并接入合适的菌种。
（4）某同学人工自酿葡萄酒时，在发酵后期向发酵液中通入空气，并将发酵液置于30～35℃环境中，结果发现发酵液中有 出现，这类微生物在糖类缺乏时可以使 转化为 ，后者再转化为 。
Ⅰ.苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。
| KH2PO4 |
1.4 g |
| Na2HPO4 |
2.1 g |
| MgSO4·7H2O |
0.2 g |
| FeCl3 |
0.1 g |
| X |
1 g |
| 维生素 |
微量 |
| 琼脂 |
15 g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL |
(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供________________
和 ，该培养基从作用看属于 。
(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 __________________________________________________
_________________________________________________________________ ，
图B效果的接种方法是 ________________________________________________
_________________________________________________________________ 。
Ⅱ.根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
(1)菊花的组织培养常用的培养基是 ，原理是 。
(2)从茶籽中提取茶油最好采用 法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是 法。
微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：
(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自____________________________ 的土壤。
(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用 培养基。常用的接种方法有__________________________________________________________
和 。
(3)接种后，应密封培养的原因是 ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取_____________________________
就可获得高效菌株。
(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为 个/mL。该统计结果 (填“低于”或“高于”)实际值。
为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，某生物兴趣小组的同学设计了如下实验(符合无菌操作要求)。请分析下述实验过程并回答下列问题：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏。
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基。
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养。
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 。
(2)本实验样品接种时最好采用 法。
培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的 。
(3)本实验设计中的一个明显错误是 ，请加以改正： ______________________________________________________________
_________________________________________________________________ 。
(4)证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是 ______________________________
_________________________________________________________________ 。
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精，但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题。
(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用 将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后，用 (方法)接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。
(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌 。从存活的酵母菌中提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。
(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含 的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如图所示：
据图分析，将转基因酿酒酵母接种在以 为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的 糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够 ，说明所需菌株培育成功。
南极自然环境是地球仅有的人类干扰少的寒冷地带的生态系统。Crooked湖是南极的淡水湖之一，该湖的主要生物以及这些生物的营养关系如下图所示。
请回答：
(1)与太湖相比，Crooked湖的自我调节能力较低，原因是 _________________
_________________________________________________________________。
(2)图中所示生物之间的关系有 。占有两个营养级的生物是 。没有表示出的生态系统成分是 。
(3)鞭毛藻同化的能量最终流向有三个：①通过自身的呼吸作用散失一部分，
②被下一营养级利用，③ 。鞭毛藻能感受光线的强弱，借助鞭毛移动到光线合适的位置进行光合作用，由此可见，生态系统的信息传递对生物的意义是 。
(4)请在下图用箭头和文字补充该生态系统的碳循环途径。
(5)现阶段有人想利用Crooked湖来大力发展极地淡水养殖，请对这种想法进行评价并说明理由： ____________________________________________________
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