[生物——选修3现代生物科技专题](15分)
2006年12月26日，国内首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农大降生，具体培育过程如下图所示，请据图回答问题。
(1)从图中可以分析出，该克隆猪的培育过程涉及的现代生物技术除了基因工程和胚胎工程外，还有___________ 。
(2)B过程中，将绿色荧光蛋白基因导入成纤维细胞最有效的方法是___________。在导入之前，需要先将目的基因与载体结合以构建___________ ，这一过程需要的主要工具包括___________ 。为了检测目的基因是否成功插入受体细胞的染色体DNA上，需要采用___________技术进行分子检测。
(3)得到早期胚胎后，可通过___________技术以获得更多的转基因克隆猪。为了给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境，在H过程之前需要对代孕母猪进行___________处理。早期胚胎能够在代孕母猪体内存活的生理学基础是___________。
(4)培育绿色荧光蛋白转基因克隆猪的遗传学原理是___________。
(5)图中决定克隆猪性别的生物个体是___________。
(6)在治疗人类疾病时，转基因克隆动物的细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体，此外，随着组织工程技术的发展，通过___________细胞体外诱导分化，也可培育出人造组织器官，从而解决目前临床上存在的供体器官不足的问题。这种细胞是由___________中分离出来的。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 、 ，对 、 进行切割。
用 酶将目的基因连接到载体上。
（2）若基因表达载体A中含有抗卡那霉素标记基因，则培养皿中应
加 筛选已导入抗病基因的香蕉细胞。
（3）香蕉组织细胞具有 性，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 、 。将 （胚状体、愈伤组织）用人工薄膜包装就得到人工种子。
右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答：
（1）该方案用到的基本技术是 该方案能达到预期效果吗？ 。原因是 。
（2）图中②为 过程，用 诱导融合，杂交瘤细胞具有 等特点。
（3）若将杂交瘤细胞进行体外培养，破伤风杆菌的抗体最终可从 中提取。
（4）该方案的目的是 。
请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、 、 以及在母体中发育和产出等过程。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和 。
（3）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，采用激素处理可一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是 。
（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是 、基
因表达载体的构建、 和 。若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人的干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其人干扰素基因、 、 、 和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是 ，为获得能产生大量人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是
（受精卵、乳腺细胞）。用 技术检测人干扰素基因是否转录出mRNA
下面五种不同的育种方法，请据图回答问题：
（1）图中A→D方向所示的途径表示 育种方式，A→B－C的途径表示
育种方式。这两种育种方式相比较，后者优越性主要表现在 。
（2）B法常用的方法为 。
（3）E法所依据的原理是
（4）C、F过程最常用的药剂是 。
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