右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答：

(1)一个基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有            、            和标记基因等。将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用       处理细胞，以增加其细胞壁的通透性。
(2)将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。以上培养基按用途属于            培养基。
(3)上述培养基上聚集的菌种可通过              法或            培养成单菌落，经进一步筛选即可获得导入重组质粒的工程菌。获得纯培养物的关键是无菌操作，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是                 。
(4)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种       、四种脱氧核苷酸和         的 DNA聚合酶。