(某实验小组用小球藻进行实验,探究影响光合速率的因素。他们将一定量的小球藻浸入适宜且相同温度的培养液的试管中,以白炽灯作为光源。移动台灯可改变光源与试管的距离;CO2浓度分别设置为0.03%和0.05%,根据实验结果绘制成曲线1、曲线2(如图所示)。请分析回答下列问题:

比较C、D两点的光合速率,可见限制D点光合速率的主要因素是。
EF段不再成为光合速率的主要限制因素,若C处突然关闭台灯,叶绿体中C3含量将如何变化?。
(2)F点的含义是。
若用缺镁培养液培养小球藻,其他条件不变,F点应向移。
(3)该小组又做了探究小球藻最适生长温度的预实验,实验结果见下表:
温度(℃)
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10
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20
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30
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40
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50
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光照下释放O2(mg/h)
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9.67
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14.67
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19.67
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21.67
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19.33
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请根据预实验结果,设计进一步的探究实验:
材料用具:小球藻、大试管、含CO2缓冲液的培养液、水浴锅(控制温度)、量筒等。
该实验应控制好的两个主要无关变量是:
①;②。
实验步骤:
第一步:将装入试管,浸入试管中,分别放入5个水浴锅中 。
第二步:分组控制温度,(温度梯度差为1℃)。
第三步:光照6 h后测定O2的释放量。