材料 饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪禽等动物由于缺乏有关酶,无法有效利用植酸,造成磷源浪费,而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成为目前重要的饲料添加剂之一。
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间内____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图:
Ⅰ中的主要成分为________;Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。______________________________________。
(3)为制备基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:________________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。
在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
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(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。
(3)PCR反应过程的前提条件是________________,PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
在进行基因工程时,已经得到一个目的基因,要人工复制,使数量增多,需要的复制条件是( )。
①CTAGGGC或GATCCCG模板链 ②含A、U、C、G碱基的核苷酸 ③含A、T、C、G碱基的核苷酸 ④核糖 ⑤脱氧核糖 ⑥酶 ⑦ATP ⑧磷酸 ⑨蛋白质
A.①③④⑦⑧⑨ B.①②④⑥⑦⑧
C.①②⑤⑥⑦⑨ D.①③⑤⑥⑦⑧
下列关于DNA复制的叙述中正确的是( )。
A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链 |
B.DNA复制不需要引物 |
C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合 |
D.DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸 |
下图表示DNA变性和复性过程,下列相关叙述中,正确的是( )。
A.向右的过程为加热(80~100 ℃)变性的过程 |
B.向左的过程是DNA双链迅速致冷复性 |
C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同 |
D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端 |
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。防止污染的办法不包括( )。
A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行 |
B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性使用,以免交叉污染 |
C.所有PCR试剂都应放置于大瓶分装,以减少重复加样次数,避免污染机会 |
D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱 |
下图所示为PCR扩增的产物,请分析此产物是哪次循环的产物( )。
A.第一次循环 | B.第二次循环 |
C.第三次循环 | D.第四次循环 |
下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作,其中正确的是( )。
A.可采集猪血作为实验材料 |
B.用蒸馏水重复洗涤红细胞 |
C.血红蛋白释放后应低速短时间离心 |
D.洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 |
在蛋白质的提取和分离中,下对样品处理过程的分析正确的是( )。
A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 |
B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的结果 |
C.洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水) |
D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 |
蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是( )。
A.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离 |
B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳分离蛋白质 |
C.根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质 |
D.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质 |
下列有关蛋白质提取和分离的说法,错误的是( )。
A.透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 |
B.采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 |
C.离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 |
D.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极移动 |
PCR技术可扩增DNA分子,电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上,并加上直流电场,可利用分子带电荷不同分离和分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。这两项技术综合应用于现代刑侦,可以获得最可靠的证据。
如图是一次寻找嫌疑犯的测试结果:图甲是把遗迹中含有21个氨基酸的多肽进行水解,将氨基酸混合物进行电泳的结果;图乙是通过提取罪犯B遗迹DNA和四位嫌疑犯的DNA进行扩增,并采用特定限制酶处理后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。
(1)在同一电场下,由于蛋白质或DNA的________以及________不同而产生不同的迁移方向或速度,从而实现样品的分离。
(2)在电泳过程中,带电分子会向着________的电极移动。
(3)由甲图可知,多肽由________种氨基酸组成;由乙图可知,B最可能的对象是________。
在DNA复制过程中,保证复制准确无误进行的关键步骤是 ( )。
A.解旋酶破坏氢键并使DNA双链解开 |
B.游离的脱氧核苷酸与母链碱基互补配对 |
C.与模板链配对的脱氧核苷酸连接成子链 |
D.子链与模板链盘绕成双螺旋结构 |
下列有关DNA分子复制的叙述,正确的是( )。
A.DNA分子在解旋酶的作用下水解成脱氧核苷酸 |
B.在复制过程中,解旋和复制是同时进行的 |
C.解旋后以一条母链为模板合成两条新的子链 |
D.两条新的子链通过氢键形成一个新的DNA分子 |
PCR的反应过程中,引起变性的因素是( )。
A.pH过高 | B.pH过低 |
C.升高温度 | D.加入酒精 |